La loi du 16 mars 1915 a interdit en France la fabrication, la vente et la circulation de l’absinthe et des liqueurs similaires (Loi, 1915). La directive européenne 88/388/CEE du 22 juin 1988 relative au rapprochement des législations des Etats membres dans le domaine des arômes, vise dans son annexe II1 la thuyone (EEC, 2008). Le décret n° 88-1024 du 2 novembre 1988 fixant les caractères des liqueurs similaires à l’absinthe, pris après avis du Conseil Supérieur d’Hygiène Publique de France, définit dans son article 1 les critères caractérisant ces liqueurs en précisant les teneurs en thuyone, en fenchone et en pino-camphone.

1Intitulé de l’annexe: Maximum limits for certains substances obtained from flavourings and other food ingredients with flavouring properties present in foodstuffs as consumed in which flavourings have been used

La pinocamphone est une cétone terpénique cyclique. Deux isomères ont été identifiés, le trans-3-pinanone (pinocamphone) et le cis-3-pinanone (isopinocamphone). Il sont identifiés chimiquement, respectivement, par les numéros CAS 547-60-4 et 18358-53-7, sous la dénomination (trans ou cis) 2,6,6-triméthyle-bicyclo[3.1.1]heptan-3-one. Sa formule chimique est C10H16O, son poids moléculaire est de 152.24 Daltons et sa formule structurelle chimique est la suivante.

La pinocamphone est présente dans les huiles essentielles d’hysope (Hyssopus officinalis L.) de la famille des Lamiacées (Labiées), un type de menthe européenne qui se trouve dans les régions méditerranéennes, à des concentrations variables selon l’espèce d’hysope et le lieu d’origine (Varga et al. 1998 ; Lachenmeier et al., 2008). Selon le standard ISO 9841, l’huile essentielle d’hysope contient entre 5,5 et 17,5 % de trans-3-pinanone et entre 34,5 et 50 % de cis-3-pinanone.

Les données disponibles publiées sur la toxicité de la pinocamphone sont trop parcellaires pour permettre de caractériser la toxicité de cette substance. Les quelques données disponibles du début des années 80 font état de cas d’intoxication humaine après la consommation de produits contenant des huiles essentielles d’hysope (Millet et al., 1981). Des manifestations Afssa – Saisine n° 2009-SA-0262 3 / 7

neurologiques (convulsions) chez l’animal ont été rapportées après administration d’huile d’hysope par voies intraveineuse ou intra-péritonéale (Steinmetz et al., 1980 ; Burkhard et al., 1999).

Le mode d’action de la pinocamphone serait similaire à celui de la thuyone, à savoir par un effet antagoniste sur les récepteurs des neurotransmetteurs tels que l’acide gamma-aminobutyrique type A (GABAA) et l’acétylcholine (Höld et al., 2002 ; Lu et al., 2002).

La pinocamphone est métabolisée in vitro par des enzymes hépatiques telles que les cytochromes CYP3A4 et des dérivés tels que les 2-hydroxy-cis-3-pinanone, 2-hydroxy-trans-3-pinanone, 4S-hydroxy-cis-3-pinanone et 2,10-dehydroxy-3-pinanone auraient été trouvés dans l’urine d’animaux après administration de deux pinanones (Höld et al., 2002). Comme pour le cas de la d-fenchone, ces données permettraient d’estimer que les pinanones sont efficacement hydrolysée, métabolisée et excrétée dans l’urine probablement sous la forme de conjugués glucuroniques (EFSA, 2008).

Etant donné que les deux isomères présentent des manifestations epileptogeniques par voie injectable, avec des puissances très différentes dépendant de l’isomère, certains auteurs ont suggéré que les deux isomères ou l’addition des deux isomères soient pris en considération lors de la réglementation de la quantité de pinanones dans l’absinthe (Lachenmeier et al., 2008).

Le Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives (JECFA) a procédé à l’évaluation de la cis-3-pinanone en tant que substance aromatisante en 2006 et 2009 (OMS, 2006 ; OMS, 2009). La cis-3-pinanone (isopinocamphone) a été identifiée par le JECFA sous le numéro 1868 et a été classée dans la classe structurelle II (voir plus bas). La conclusion du JECFA indique que la cis-3-pinanone ne présente pas de préoccupation de sécurité sanitaire (no safety concern) sur la base des estimations de la consommation en tant que substance aromatisante.

La cis-3-pinanone (isopinocamphone) fait partie du répertoire des substances aromatisantes utilisées dans ou sur les denrées alimentaires établi par la Commission européenne en 1999 (EC, 1999). Elle a été identifiée par les numéros CAS 18358-53-7, CoE 11125, EINECS 242-228-5 présente dans ces répertoires sous la référence FL 07-171 (EC, 2002).

Dans ce contexte, l’Aesa a procédé à l’évaluation de l’isopinocamphone au sein du groupe FGE.47 (Flavouring Group Evaluation 47) en 2008 (EFSA, 2008). De manière générale, l’Aesa applique une procédure modifiée pour estimer de manière plus réaliste l’exposition aux substances aromatisantes prenant en compte les niveaux d’usage habituels rapportés par l’industrie. Le résultat de son évaluation conclut que l’isopinocamphone peut être classée dans Afssa – Saisine n° 2009-SA-0262 4 / 7

Des concentrations très variables de pinocamphone totale ont été mésurées dans des liqueurs d’absinthe provenant de divers pays européens. La 3-cis-pinanone (isopinocamphone) est une substance aromatisante répertoriée au niveau communautaire. Les évaluations toxicologiques de la cis-3-pinanone (isopinocamphone) conduites par l’Aesa et le JECFA dans le cadre de l’évaluation des substances aromatisantes ont conclu que la 3-cis-pinanone (isopinocamphone) appartenait à la classe structurelle II (seuil d’exposition 540 μg/personne/jour) selon la procédure du JECFA. Le JECFA a estimé que la consommation en tant que substance aromatisante de l’isopinocamphone ne présentait pas de préoccupation de sécurité sanitaire (no safety concern). L’Aesa, cependant, a estimé pour sa part que des données d’exposition plus fiables à la cis-3-pinanone (isopinocamphone) étaient necéssaires afin de reconsidérer cette évaluation. De même, plus d’informations ont été demandées sur les spécifications chimiques des mélanges proposés dans le commerce.

La fenchone est un mono terpène cyclique, identifié par le numéro CAS 1195-79-5. Son isomère optique, la D-fenchone (ou d-fenchone) est identifiée par le numéro CAS 4695-62-9 sous les dénominations chimiques 1,3,3-Trimethyl-bicyclo[2.2.1]heptan-2-one ou d-1,3,3-Trimethyl-2-norbonanone. Sa formule chimique est C10H16O, son poids moléculaire est de 152.24 Daltons et sa formule structurelle chimique est la suivante.

La fenchone se trouve dans les huiles essentielles du fenouil (Foeniculum spp.) à des concentrations variables selon l’espèce de fenouil et le lieu d’origine. Selon la Pharmacopée européenne, l’huile essentielle de fenouil amer produite à partir des parties aériennes de la plante (Foeniculum vulgare Miller subsp. vulgare var. vulgare) peut contenir entre 7 et 25 % de fenchone (7 à 16 % s’il s’agît du type Espagne ou 10 à 25 % s’il s’agît du type Tasmanie). L’huile essentielle de fenouil amer produite à partir des fruits de la plante peut contenir entre 12 et 25 % de fenchone. Le fruit de fenouil doux (Foeniculum vulgare Miller subsp. vulgare var. dulce) contient au maximum 7,5 % de fenchone dans l’huile essentielle (EMEA, 2006a ; 2006b ; 2006c ; Pharmacopée européenne, 2007).

En France, les liqueurs similaires à l’absinthe (interdites) sont définies par une teneur en fenchone supérieure à 5 mg par litre (Décret, 1988). Un plan de contrôle DGCCRF réalisé en 2004 sur 35 échantillons de liqueurs ou spiritueux à base de plantes (14 liqueurs de génépi, 14 spiritueux aux plantes d’absinthe et 10 spiritueux divers aux plantes) fait état d’un résultat d’analyse supérieur à 5 mg par litre, 14 inférieurs à 5 mg par litre et 23 résultats non quantifiables). Des études récentes sur la composition chimique de liqueurs d’absinthe provenant, notamment depuis 2003, de divers pays et différents types de production font état de concentrations en fenchone de l’ordre de 0,1 à 95,6 mg par litre (Lachenmeier, 2008). Afssa – Saisine n° 2009-SA-0262 5 / 7

Les données disponibles publiées sur la toxicité de la fenchone sont trop parcellaires pour permettre de caractériser la toxicité de cette substance. Certaines publications font état de doses létales (LD50) établies chez l’animal avec la fenchone (6160 mg/kg poids corporel) et avec de l’huile de fenouil (3100 et 3120 mg/kg poids corporel) (Lachenmeier, 2008 ;HSDB, 2001 ; Jenner et al. 1964). A titre de comparaison, les LD50 établies chez l’animal pour la thuyone sont de 192 mg/kg poids corporel et 500 mg/kg poids corporel (SCF, 2003).

La fenchone est métabolisée in vitro par des enzymes hépatiques telles que les cytochromes CYP2A6 et CYP2B6 donnant lieu à des dérivés hydroxylés (Miyazawa et Gyoubu, 2006 ; 2007), qui peuvent ensuite être métabolisés dans des dérivés carboxylés. Des dérivés tels que les 4-hydroxyfenchone et p-apofenchone-3- acide carboxylique auraient été trouvés dans l’urine de chiens après administration de d-fenchone. Ces données permettraient d’estimer que la d-fenchone est efficacement hydrolysée, métabolisée et excrétée dans l’urine probablement sous la forme de conjugués glucuroniques (EFSA, 2008).

Le Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives (JECFA) a procédé à l’évaluation de la d-fenchone en tant que substance aromatisante en 2006 (OMS, 2006). La d-fenchone a été identifiée par le JECFA sous le numéro 1396. La conclusion du JECFA indique que la d-fenchone ne présente pas de préoccupation de sécurité sanitaire (no safety concern) sur la base des estimations de la consommation en tant que substance aromatisante basées sur les volumes de production provenant des Etats Unis et de l’Europe. Ces estimations concluent à une consommation théorique en tant que substance aromatisante de 7 μg (microgrammes) de d-fenchone par jour (soit 0,1 μg/kg de poids corporel/jour) en Europe et de 5 μg de d-fenchone par jour (soit 0,09 μk/kg poids corporel/jour) aux Etats Unis.

La fenchone et la d-fenchone font partie du répertoire des substances aromatisantes utilisées dans ou sur les denrées alimentaires établi par la Commission européenne en 1999 (EC, 1999). Elles ont été identifiées par les numéros FEMA 2479, CoE 551 et EINECS 225-160-0 et ont été classées dans le groupe chimique 08, respectivement, sous les références FL 07-037 et FL 07-159 (EC, 2002).

Dans ce contexte, l’Aesa a procédé à l’évaluation de la d-fenchone au sein du groupe FGE.87 (Flavouring Group Evaluation 87) en 2008 (EFSA, 2008). Le résultat de son évaluation conclut que la d-fenchone peut être classée dans la classe structurelle II selon la procédure du JECFA, mais qu’en raison du manque d’information sur la composition des mélanges aromatisants proposés, permettant d’affiner l’exposition, l’Aesa reste réservée pour plusieurs substances du groupe FGE.87, dont la d-fenchone.

Des concentrations très variables de d-fenchone ont été mésurées dans des liqueurs d’absinthe provenant de divers pays européens. La fenchone et la d-fenchone sont des substances aromatisantes répertoriées au niveau communautaire. Très peu de données toxicologiques sur la d-fenchone sont disponibles. Les évaluations toxicologiques de la d-fenchone conduites par l’Aesa et le JECFA dans le cadre de l’évaluation des substances aromatisantes ont conclu que la d-fenchone appartenait à la classe structurelle II (seuil d’exposition 540 μg/personne/jour), selon la procédure du JECFA. Le JECFA a estimé que la consommation en tant que substance aromatisante de la d-fenchone ne présentait pas de préoccupation de sécurité sanitaire (no safety concern). L’Aesa, cependant, a estimé que des données sur la composition des mélanges aromatisants proposés était nécessaire pour affiner l’exposition. Afssa – Saisine n° 2009-SA-0262 6 / 7

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